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tp_javel [2024/10/04 16:02] – créée techmicrobiotp_javel [2024/10/05 15:56] (Version actuelle) – [hypochlorites et eaux de Javel : détermination de la CMI et dosage microbiologique 2004] techmicrobio
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-====== hypochlorites et eaux de Javel : détermination de la CMI et dosage microbiologique +====== Hypochlorites et eaux de Javel : détermination de la CMI et dosage microbiologique 2004 ======
-2004 ======+
  
- +Ce TP a été réalisé dans le cadre d'un stage pour des professeurs de Sciences physiques. 
 +Les unités utilisées sont désuètes. Voir l'article [[microbiologie|eau de javel]] pour traduire.
  
-aller à l'article hypochlorites et eaux de Javel : unités de concentration, préparation des solutions désinfectantes paru dans l'Opéron (version électronique) 
  
-Comme promis, voici les données du stage pour la partie microbiologique. +==== 1. Détermination de la CMI ====
- +
-Dans un premier temps ne figurent que les images. Vous voudrez bien patienter pour la suite ! +
- +
-===== 1. détermination de la CMI =====+
  
 La technique utilisée, contestable..., est classique par une suite de dilutions au 1/2. La technique utilisée, contestable..., est classique par une suite de dilutions au 1/2.
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-==== dosage microbiologique ====+==== 2. Dosage microbiologique ====
  
  
-Les deux boîtes sont ensemencées avec E. coli en surface à l'écouvillon, à partir de la suspension réalisée pour la CMI. On remarquera que des petites morceaux de gélose apparaissent en surface à cause des chocs de l'écouvillon sur les bords des trous ! +Les deux boîtes sont ensemencées avec //E. coli// en surface à l'écouvillon, à partir de la suspension réalisée pour la CMI. On remarquera que des petites morceaux de gélose apparaissent en surface à cause des chocs de l'écouvillon sur les bords des trous !
-Les puits sont inoculés avec 70 µL de dilutions d'eau de Javel (préparées dans la microplaque de la CMI) ou de solution inconnue. Les diamètres traduisent l'inhibition. Les concentrations réelles seront placées dès que possible sur l'image. +
-Après lecture, les différentes boîtes et microplaque doivent être éliminées par la filière des déchets contaminés (autoclavage).+
  
 +{{:javel:eau_de_javel_microplaque.jpg?400|}}
 +
 +Les puits sont inoculés avec 70 µL de dilutions d'eau de Javel (préparées dans la microplaque de la CMI) ou de solution inconnue. Les diamètres traduisent l'inhibition.
 +Après lecture, les différentes boîtes et microplaque doivent être éliminées par la filière des déchets contaminés (autoclavage, Dasri).
 +
 +{{:javel:eau_de_javel_boites.jpg?400|}}
  
  
 Les résultats expérimentaux préalables (mais réels !) ont été analysés avec Excel : Les résultats expérimentaux préalables (mais réels !) ont été analysés avec Excel :
 +^ Dilution         ^ Concentration (°chl)          ^ diamètre (mm)                         ^diamètre au carré (mm2)^
 +|1/256 |0,19 |8,5 |72,25|
 +|1/128 |0,38 |11 |121|
 +|1/64 |0,75 |16 |256|
 +|1/32 |1,50 |24 |576|
 +|1/16 |3,00 |infini |infini|
  
-Dilution Concentration 
-(°chl) diamètre (mm) diamètre (mm) au carré 
-1/256 0,19 8,5 72,25 
-1/128 0,38 11 121 
-1/64 0,75 16 256 
-1/32 1,50 24 576 
-1/16 3,00 infini infini 
 1° régression en fonction du carré du diamètre : 1° régression en fonction du carré du diamètre :
 y = 389,86 x + 17,8 y = 389,86 x + 17,8
 r2 = 0,995 r2 = 0,995
 +
 +{{:javel:g21.gif?200|}}
  
 2° régression linéaire en fonction du diamètre : 2° régression linéaire en fonction du diamètre :
 y = 11,757 x + 6,6087 y = 11,757 x + 6,6087
 r2 = 0,9965 r2 = 0,9965
 +{{:javel:g22.gif?200|}}
   
-On remarquera que la meilleure régression est celle en fonction du diamètre... ce qui n'est pas "normal". La courbe permettra bien évidemment la réalisation de la mesure de la concentration de la solution inconnue par report du diamètre.+Remarquer que la meilleure régression est celle en fonction du diamètre... ce qui n'est pas "normal". La courbe permettra bien évidemment la réalisation de la mesure de la concentration de la solution inconnue par report du diamètre.
 Il va de soi qu'une sérieuse limite au dosage microbiologique est l'étroitesse de la zone de mesure, ce qui impose de multiplier les essais si la valeur cible approximative n'est pas connue. Il va de soi qu'une sérieuse limite au dosage microbiologique est l'étroitesse de la zone de mesure, ce qui impose de multiplier les essais si la valeur cible approximative n'est pas connue.
  

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